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菌體自溶法

當微生物遇到對生長不利的條件時，微生物就會利用微生物細胞中本身具有的各種RNA分解酶，啟動核糖體自溶系統，使RNA自溶，以獲得足夠維持生存的能量。菌體自溶法是在一定條件下由細菌自溶降解其自身的核糖核酸，從而獲得核苷酸的方法。因為效率太低，而且提取困難，菌體自溶法目前基本不用。

酶水解RNA法

酶水解RNA法是以酵母或白地霉細胞等為原料，利用磷酸二酯酶水解核糖核酸來制備鳥苷酸的方法,主要包括從菌體中提取RNA、5'-磷酸二酯酶制備、RNA的酶解和單核酸的分離、純化。此方法起源于20世紀60年代初，日本的國中明發現了利用橘青霉（Penicilliumcitrinum）提取的5'-磷酸二酯酶可以降解RNA生成5'-核苷酸。Chemicalbook酶水解RNA法關鍵酶是青霉菌5'-磷酸二酯酶，由于副產品較多，此方法目前也不常用。5'-磷酸二酯酶以桔青酶或金色鏈霉菌為出發菌種，通過液體深層發酵法獲得，其工藝流程如下：斜面菌種培養→種子培養→發酵培養→濾液。